1 Daicel手(shǒu)性(xìng)柱使用溶(róng)劑的(dí)限製
*,手性(xìng)柱(zhù)固(gù)定相對(duì)溶劑很(hěn)敏(mǐn)感,使用(yòng)時稍有不慎,即可對(duì)固定相(xiāng)造(zào)成不可(kě)修(xiū)復(fù)的(dí)損傷。
一般(bān)情(qíng)況(kuàng)下,要避免使(shǐ)用的(dí)溶劑有丙酮,氯仿,二氯甲(jiǎ)烷,THF和DMSO等(děng),即(jí)使少量(liáng)上(shàng)述(shù)溶劑殘留(liú)在(zài)管路,進樣(yàng)閥(fá)中也(yě)是色(sè)譜(pǔ)柱(zhù)的(dí)潛(qián)在(zài)威脅(xié),所以(yǐ)事先必須清洗(xǐ)幹淨(jìng)。
2 為(wéi)什(shí)麼(mó)柱(zhù)效會降低?有沒(méi)有再生方法?
所(suǒ)有大賽璐柱子在出廠(chǎng)前均已檢測(cè)柱效合格。
造(zào)成(chéng)柱效(xiào)降低(dī)的(dí)原(yuán)因(yīn)有:
1) 柱效急速(sù)下降
絕大多(duō)數(shù)情況是(shì)色譜(pǔ)柱固(gù)定(dìng)相(xiāng)被(bèi)損傷(shāng)(溶(róng)解(jiě)/水解脫落),造(zào)成(chéng)固定(dìng)相(xiāng)損(sǔn)傷的物質可能來(lái)源(yuán)於(yú)樣品,溶劑(jì),也(yě)可能(néng)來源於(yú)上(shàng)一(yī)次進樣(yàng)殘(cán)留(liú)於管(guǎn)路,進(jìn)樣(yàng)閥中的雜(zá)質(zhì)。
這種情況(kuàng)對柱子衝(chōng)洗(xǐ)或再(zài)生已無(wú)效(xiào)。
2) 柱效逐漸(jiàn)下降(jiàng)
原因:有強(qiáng)保留(liú)物質逐(zhú)漸聚集(jí)在柱(zhù)頭(tóu)篩板(bǎn)甚(shèn)至(zhì)是固定(dìng)相上
解決辦(bàn)法:用(yòng)強(qiáng)溶劑衝洗或更(gēng)換篩板(bǎn)
3) 舊柱子(zǐ)能分(fēn)開的化(huà)合物(wù)換(huàn)上(shàng)新柱子就分不開了(liǎo)
原因(yīn):“記憶效(xiào)應(yīng)”(有(yǒu)時(shí),也(yě)有批(pī)次間的(dí)差(chà)異),一(yī)些強保(bǎo)留(liú)物(wù)質(如(rú)additive)保留(liú)在固定相上對手性(xìng)誘(yòu)導環境有一定的(dí)影響。
解(jiě)決辦法:如(rú)果(guǒ)之前用過(guò)添加(jiā)劑(jì),就(jiù)在流(liú)動(dòng)相(xiāng)中繼(jì)續添加此(cǐ)類添加劑,並對柱(zhù)子(zǐ)平(píng)衡數小時再(zài)進樣,但此方法有(yǒu)時(shí)仍然(rán)解(jiě)決不(bù)了問題,這(zhè)時應(yīng)該(gāi)可慮更(gēng)換其它的分離條(tiáo)件(jiàn)。
3 如(rú)果(guǒ)樣(yàng)品(pǐn)不溶於(yú)正(zhèng)己(jǐ)烷(wán)/醇體係,怎(zěn)麼辦(bàn)?
一(yī)般(bān)情況(kuàng)下,分析用時,0.5-1mg/mL的(dí)濃度就(jiù)可以滿(mǎn)足檢(jiǎn)測(cè),所以不用(yòng)加(jiā)大(dà)樣(yàng)品(pǐn)濃度
對(duì)於(yú)酸,鹼(jiǎn)化(huà)合物,在(zài)流(liú)動相中適當(dāng)的加(jiā)入少(shǎo)量的強酸或強(qiáng)鹼(jiǎn)(如TFA/DEA)有助(zhù)於樣品的溶(róng)解,推(tuī)薦(jiàn)添加(jiā)濃度在(zài)0.1-0.2%,大(dà)於此(cǐ)濃(nóng)度會(huì)損壞固(gù)定(dìng)相(xiāng)。
4 幾(jī)種常(cháng)用(yòng)手性柱的使用(以(yǐ)5μ和10μ填(tián)料(liào)為(wéi)例(lì))
1)Chiralpak AD
IPA:0-100% in alkane(n-hexane or iso-hexane, or n-heptane)
EtOH: 0-15% in alkane or 60-100% in alkane(n-hexane or iso-hexane, or n-heptane)
MeOH: (1)0-100% EtOH or IPA in MeOH or 0-15% ACN in MeOH
Ideal starting conditions: MeOH/EtOH 50:50(v/v) when alcohol mixtures are required
(2)0-15% in alkane or 60-100% in alkane(n-hexane or iso-hexane, or n-heptane)
【注(zhù)意:使(shǐ)用純極性溶劑(jì)做流(liú)動(dòng)相後(hòu),此(cǐ)色譜柱應(yīng)做(zuò)到專柱(zhù)】
ACN:not compatible with alkane
0-100% IPA in ACN or 0-15% MeOH or EtOH in CAN
【注(zhù)意(yì):使用純極性溶劑(jì)做(zuò)流動(dòng)相後(hòu),此色譜(pǔ)柱應做到專(zhuān)柱】
MTBE: Not allowed
Acid: TFA or CH3COOH, <0.5%, Typically 0.1%
Base: DEA or Butyl amine or Ethanol amine, <0.5%, Typically 0.1%
Column-Temp: below 40DEG
2)Chiralpak AD-H
同(tóng)Chiralpak AD,不(bù)同之(zhī)處在於(yú),當使用正(zhèng)己烷(wán)/乙醇(甲(jiǎ)醇(chún))體係(xì)時,醇比(bǐ)例範圍(wéi)可以是(shì)0-100%
3) Chiralpak OD-H
同AD-H,不(bù)同之處(chǔ)在於(yú),OD-H可以使(shǐ)用MTBE/alkane(或Alkane/EtOH),MTBE<50%, 當使用(yòng)MTBE後,色譜柱平(píng)衡(héng)時間要加長
4) Chiralpak OD
同(tóng)OD-H,不(bù)同之處在於,OD不能使(shǐ)用(yòng)ACN體係