詳(xiáng)細介紹(shào)：

 大鼠(shǔ) （Rat） 白細胞(bāo)介素(sù)-6（IL-6）ELISA 檢測試劑(jì)盒
本試劑僅供研究使用  標(biāo)本(běn)：細胞(bāo)培(péi)養(yǎng)上清液(yè)

試驗原理(lǐ)：
IL-6試劑盒(hé)是(shì)固相夾(jiā)心法酶(méi)聯免疫吸附實(shí)驗（ELISA）.已(yǐ)知(zhī)IL-6濃度(dù)的標準(zhǔn)品，未知(zhī)濃(nóng)度的樣品加入微孔酶(méi)標(biāo)板(bǎn)內(nèi)進(jìn)行檢(jiǎn)測(cè)
。先將IL-6和(hé)生(shēng)物素標(biāo)記的抗(kàng)體同時溫(wēn)育
。洗滌後，加入親(qīn)和素標記(jì)過的(dí)HRP
。再(zài)經過溫育和(hé)洗滌(dí)，去除(chú)未結(jié)合的酶結合物，然後(hòu)加(jiā)入底物(wù)A，B，和酶(méi)結合物同時作(zuò)用(yòng)
。產(chǎn)生顏色
。顏色(sè)的深淺(qiǎn)和(hé)樣品中(zhōng)IL-6的(dí)濃度(dù)呈比例關係(xì)
。

試(shì)劑(jì)盒內容及(jí)其配製(zhì)
試劑盒(hé)成份（2-8℃保(bǎo)存） 96孔配置(zhì) 48孔(kǒng)配置(zhì) 配(pèi)製
96/48人(rén)份酶標(biāo)板 1塊(kuài)板(bǎn)（96T） 半(bàn)塊板（48T） 即用(yòng)型
塑料(liào)膜(mó)板蓋(gài) 1塊 半塊 即用型(xíng)
標(biāo)準品：800pg/ml 1瓶(píng)（0.6ml） 1瓶(píng)（0.3ml） 按說明(míng)書進(jìn)行(háng)稀稀(xī)
空白對(duì)照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即(jí)用(yòng)型(xíng)
標準(zhǔn)品(pǐn)稀(xī)釋(shì)緩(huǎn)衝液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用(yòng)型(xíng)
生物素(sù)標(biāo)記的抗IL-6抗(kàng)體(tǐ) 1瓶（6ml） 1瓶(píng)（3.0ml） 即(jí)用型
親和(hé)鏈酶(méi)素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用(yòng)型(xíng)
洗(xǐ)滌緩衝液 1瓶（20ml） 1瓶(píng)（10ml） 按說(shuō)明(míng)書進(jìn)行稀釋(shì)
底(dǐ)物(wù)A 1瓶（6.0ml） 1瓶(píng)（3.0ml） 即(jí)用(yòng)型(xíng)
底物(wù)B 1瓶(píng)（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型(xíng)
終(zhōng)止液(yè) 1瓶(píng)（6.0ml） 1瓶(píng)（3.0ml） 即用型(xíng)

自備(bèi)材料(liào)
1． 蒸餾(liù)水(shuǐ)
。
2． 加(jiā)樣器：5ul，10ul，50ul，100ul，200，500ul，1000ul
。
3． 振蕩(dàng)器(qì)及(jí)磁力(lì)攪(jiǎo)拌器等
。

安(ān)全性
1． 避免直接(jiē)接觸終(zhōng)止液和底物A，B
。一旦接觸到這(zhè)些液體，請(qǐng)盡(jìn)快(kuài)用(yòng)水衝(chōng)洗
。
2． 實驗(yàn)中不要吃喝(hē)，抽煙或使(shǐ)用化(huà)妝品
。
3． 不(bù)要用嘴吸取試(shì)劑(jì)盒(hé)裏的任(rèn)何(hé)成份(fèn)
。

操作注意事(shì)項
1． 試(shì)劑(jì)應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用(yòng)前恢(huī)復(fù)到室溫
。稀稀過(guò)後的(dí)標準品(pǐn)應(yīng)丟(diū)棄(qì)，不(bù)可保(bǎo)存(cún)
。
2． 實(shí)驗中不(bù)用的板(bǎn)條(tiáo)應(yīng)立(lì)即(jí)放(fàng)回包裝袋中，密封保存，以(yǐ)免(miǎn)變(biàn)質(zhì)
。
3． 不用的其(qí)它(tā)試(shì)劑應包(bāo)裝(zhuāng)好或蓋好
。不同(tóng)批(pī)號(hào)的(dí)試(shì)劑不(bù)要混用
。保(bǎo)質前使用
。
4． 使(shǐ)用(yòng)一次性(xìng)的吸(xī)頭(tóu)以(yǐ)免(miǎn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染，吸取終(zhōng)止(zhǐ)液和底物(wù)A，B液時，避免使用帶金屬(shǔ)部(bù)分的加樣器
。
5． 使用幹淨的塑料(liào)容器配(pèi)置洗滌(dí)液(yè)
。使(shǐ)用(yòng)前充分混匀(yún)試(shì)劑(jì)盒裏的各種(zhǒng)成份及(jí)樣(yàng)品(pǐn)
。
6． 洗滌(dí)酶標板時應充(chōng)分(fēn)拍(pāi)幹，不要將吸水(shuǐ)紙直(zhí)接放入酶(méi)標反應(yīng)孔(kǒng)中吸水
。
7． 底(dǐ)物A應揮(huī)發，避免(miǎn)長(cháng)時(shí)間(jiān)打(dǎ)開(kāi)蓋(gài)子
。底物B對(duì)光(guāng)敏感，避(bì)免(miǎn)長時間暴(bào)露於光下
。避免用(yòng)手(shǒu)接觸(chù)，有(yǒu)毒(dú)
。實(shí)驗完成後應立(lì)即(jí)讀(dú)取(qǔ)OD值
。
8． 加入(rù)試劑(jì)的順序(xù)應一致，以(yǐ)保(bǎo)證所有(yǒu)反(fǎn)應(yīng)板孔(kǒng)溫育(yù)的(dí)時間一樣(yàng)
。
9． 按照(zhào)說明(míng)書(shū)中標明(míng)的(dí)時間，加液的量(liáng)及順序(xù)進(jìn)行溫(wēn)育操作
。

樣品(pǐn)收(shōu)集，處理及保存方法(fǎ)
1， 血(xiě)清(qīng)-----操作過程中避(bì)免(miǎn)任何(hé)細胞刺激
。使用不含(hán)熱(rè)原(yuán)和內毒素(sù)的(dí)試(shì)管(guǎn)
。收集(jí)血(xiě)液(yè)後(hòu)，1000×g離(lí)心10分(fēn)鐘將(jiāng)血(xiě)清(qīng)和紅(hóng)細胞(bāo)迅速小(xiǎo)心(xīn)地分離(lí)
。
2， 血漿(jiāng)-----EDTA，檸檬酸鹽(yán)，肝素血(xiě)漿(jiāng)可(kě)用(yòng)於(yú)檢(jiǎn)測
。1000×g離(lí)心30分(fēn)鐘(zhōng)去除顆粒(lì)
。
3， 細(xì)胞上清液(yè)---1000×g離(lí)心(xīn)10分鐘(zhōng)去(qù)除(chú)顆粒(lì)和聚合(hé)物
。
4， 保存(cún)------如(rú)果樣品(pǐn)不(bù)立(lì)即(jí)使用(yòng)，應將其分成小部分-70 ℃保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)冷凍
。盡可能的不要(yào)使(shǐ)用(yòng)溶血或高血(xiě)脂血
。如果(guǒ)血(xiě)清中大(dà)量顆粒，檢(jiǎn)測前先離心或過(guò)濾
。不(bù)要在(zài)37℃或(huò)更高的溫度(dù)加熱解凍
。應在室溫(wēn)下解(jiě)凍並(bìng)確保樣品均(jūn)匀地充(chōng)分(fēn)解凍(dòng)
。

試劑(jì)的準備
1． 標準品：標(biāo)準品(pǐn)的係列(liè)稀(xī)釋應在(zài)實驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不(bù)能(néng)儲存(cún)
。稀釋(shì)前將標準品振蕩混匀
。稀釋比例按下表(biǎo)中進行(háng)：
800 pg/ml （6號(hào)標準品） 原倍濃(nóng)度(dù)不用稀(xī)釋直接(jiē)加入50ul
。
400 pg/ml （5號標準品(pǐn)） 100ul的原倍標準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準品(pǐn)稀釋(shì)液(yè)
200 pg/ml （4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的5號標準品(pǐn)加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀(xī)釋液(yè)
100 pg/ml （3號標(biāo)準(zhǔn)品） 100ul的4號標準品加(jiā)入100ul的標(biāo)準品稀(xī)釋液
50 pg/ml （2號(hào)標準品(pǐn)） 100ul的3號標準(zhǔn)品(pǐn)加(jiā)入(rù)100ul的標準品(pǐn)稀(xī)釋(shì)液(yè)
25 pg/ml （1號(hào)標準品） 100ul的2號標準品加(jiā)入100ul的標準品稀釋(shì)液
0 pg/ml （空(kōng)白對照(zhào)） 原(yuán)始濃度(dù)不用(yòng)稀釋直接(jiē)加入(rù)50ul
。

2． 洗滌(dí)緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)（50×）的(dí)稀釋(shì)：蒸餾水50倍稀釋(shì)
。

操(cāo)作步驟
1． 使(shǐ)用前，將所有試劑充分混匀(yún)
。不(bù)要(yào)使(shǐ)液(yè)體(tǐ)產生大量(liáng)的(dí)泡沫，以免加(jiā)樣(yàng)時加入大量的氣(qì)泡，產生(shēng)加樣(yàng)上(shàng)的(dí)誤(wù)差
。
2． 根據待(dài)測(cè)樣品數(shù)量加(jiā)上(shàng)標(biāo)準品(pǐn)的(dí)數(shù)量(liáng)決定所(suǒ)需的板條(tiáo)數
。每(měi)個標準品和空(kōng)白(bái)孔(kǒng)建議(yì)做(zuò)復孔(kǒng)
。每(měi)個樣(yàng)品(pǐn)根(gēn)據(jù)自己的(dí)數量(liáng)來定，能(néng)使(shǐ)用(yòng)復(fù)孔的盡量做復(fù)孔(kǒng)
。
3． 加入(rù)稀釋好(hǎo)後的(dí)標(biāo)準品50ul於反應(yīng)孔(kǒng)，加入(rù)待測樣品50ul於反應孔內(nèi)
。立即(jí)加入(rù)50ul的生(shēng)物素(sù)標記的抗(kàng)體
。蓋上(shàng)膜(mó)板，輕輕(qīng)振蕩(dàng)混匀(yún)，37℃溫育1小時(shí)
。
4． 甩去孔內液體(tǐ)，每(měi)孔(kǒng)加(jiā)滿洗滌液(yè)，振蕩30秒，甩去(qù)洗(xǐ)滌(dí)液(yè)，用(yòng)吸水紙拍(pāi)幹
。