BD培(péi)養基(jī)(Medium)是供微(wēi)生(shēng)物(wù),植物組織和動物組(zǔ)織生(shēng)長和維(wéi)持(chí)用的(dí)人(rén)工配製(zhì)的(dí)養料,一般(bān)都(dū)含有(yǒu)碳(tàn)水化合物(wù),含氮(dàn)物(wù)質(zhì),無機(jī)鹽(包括微量(liáng)元素)以(yǐ)及(jí)維生素和水(shuǐ)等。有的(dí)培養基(jī)還含(hán)有抗(kàng)菌素和色素,用於(yú)單種(zhǒng)微生(shēng)物培(péi)養和鑒定(dìng)。
1.配(pèi)料
配(pèi)方(fāng)換算→在容(róng)器(qì)中加(jiā)入(rù)少(shǎo)量水〔蒸餾(liù)水(shuǐ),自(zì)然(rán)水〕→按(àn)照配(pèi)方(fāng)稱取各種藥品(pǐn)〔依(yī)次加入(rù)〕→加足所(suǒ)需水量《一(yī)藥一勺,取(qǔ)藥後(hòu)立(lì)即蓋(gài)上瓶蓋》。
2.溶解(jiě)
澱粉溶(róng)解(jiě):少(shǎo)量冷(lěng)水調成(chéng)糊(hū)狀(zhuàng)加(jiā)熱溶(róng)解,特別(bié)是加(jiā)有(yǒu)瓊脂(zhī)的(dí)培養(yǎng)基,一定(dìng)要煮沸,瓊脂的熔解(jiě)溫(wēn)度(dù)95~97℃ ,且需(xū)要(yào)邊(biān)加熱(rè)邊攪(jiǎo)拌以(yǐ)防(fáng)止燒(shāo)焦。
3.調(tiáo)PH
用(yòng)1N的(dí)鹽酸或的(dí)1N NaOH把(bǎ)培養基調(tiáo)節到(dào)所(suǒ)要(yào)求的值(zhí)。
4.過濾
濾(lǜ)紙(zhǐ)或棉花(huā)進(jìn)行(háng)過濾(lǜ)。
5.分裝
一(yī)般培養(yǎng)基(jī)放在(zài)三角瓶(píng)或試(shì)管(guǎn)中滅菌使用。
(1)三(sān)角(jiǎo)瓶
若作(zuò)靜(jìng)置培養(yǎng),則100 ml培(péi)養基/250 ml的(dí)三(sān)角(jiǎo)瓶(píng),zui多(duō)不能超(chāo)過150 ml培養(yǎng)基/250 ml的三角(jiǎo)瓶(píng),否則(zé)滅菌時(shí)培(péi)養基沸(fèi)騰容易(yì)汙(wū)染(rǎn)棉塞(sāi),造(zào)成染菌;若作搖瓶(píng)培(péi)養,則(zé)15~20 ml培養基(jī)/250ml的(dí)三(sān)角(jiǎo)瓶(píng),保證(zhèng)通氣良好。
(2)試(shì)管(guǎn)分(fēn)裝
液(yè)體(tǐ)培養基一般裝4~5 ml,約試管的(dí)1/4高度(dù);
固體斜麵培養基(jī)一(yī)般(bān)裝3~4 ml,約試(shì)管(guǎn)的(dí)1/5高度。
6.包紮(zā)
分裝好後,塞上棉塞,在用(yòng)牛皮紙將棉塞包裹(guǒ)好,防(fáng)止滅菌(jūn)時水份進(jìn)入把棉塞弄濕。
7.滅菌
按(àn)配方上(shàng)要求(qiú)的溫度,壓力(lì)進行(háng)高壓蒸汽(qì)滅(miè)菌。如(rú)果滅(miè)菌的(dí)溫度太高,營養成分會被破(pò)壞,培(péi)養(yǎng)基中(zhōng)的(dí)糖,氨基酸會使(shǐ)培養基的(dí)顏(yán)色變深。
8.擺斜麵
滅菌後(hòu)需要擺斜(xié)麵的(dí)試管(guǎn)要趁熱斜(xié)著擺放,使其(qí)凝(níng)固成(chéng)為一個斜麵,約(yuē)占(zhān)試管(guǎn)長度(dù)的1/2。
9.貯(zhù)存
培(péi)養基(jī)在(zài)30℃下放(fàng)置一天,無汙染的(dí)即(jí)可使用。一般用(yòng)牛(niú)皮紙包(bāo)裹好存(cún)放於2-8℃冰(bīng)箱中備用。